流式细胞术不能用于（） A. T细胞表型测定 B. T细胞总数测定 C. 分离B细胞 D. 淋巴细胞分离 E. 定位检测

流式细胞术不能用于（） A. T细胞表型测定 B. T细胞总数测定 C. 分离B细胞 D. 淋巴细胞分离 E. 定位检测

流式细胞术（FC）是对悬浮于流体中的单细胞或生物粒子进行快速定量分析和分选的技术，其核心依赖于单细胞悬液通过激光检测区产生的散射光和荧光信号。但该技术无法获取细胞在组织中的空间分布信息，因为样品需解离为单细胞悬液后才能分析。

选项分析：

A. T细胞表型测定：通过荧光标记抗体检测细胞表面标志物（如CD3、CD4），属于流式的核心应用之一，即免疫表型分析。

B. T细胞总数测定：流式可通过计数特定荧光标记的细胞群（如CD3+细胞）实现定量，每秒能分析数千个细胞，适合统计细胞总数。

C. 分离B细胞：带分选功能的流式细胞仪（分选仪）可根据荧光信号差异，通过电场偏转分离特定细胞亚群（如CD19+ B细胞）。

D. 淋巴细胞分离：利用前向散射光（FSC）和侧向散射光（SSC）可初步区分淋巴细胞、单核细胞等，结合表面标志物分选可实现纯化。

E. 定位检测：流式需将组织解离为单细胞悬液，破坏了细胞原有的空间位置，因此无法分析细胞在组织中的定位。此类需求需通过免疫组织化学或共聚焦显微镜实现。

结论：流式细胞术的固有局限在于无法保留样品的空间结构，因此定位检测（E） 是其不能完成的功能。这一技术更擅长单细胞水平的定量分析，而非组织层面的空间分布研究。