
【简答题】写出PDA培养基配方及配制方法。
PDA培养基(Potato Dextrose Agar)是微生物学和真菌培养中最常用的基础培养基之一,其核心成分为马铃薯提取液提供天然营养,葡萄糖提供碳源,琼脂作为凝固剂。标准配方(每升)包含:马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂15-20克,pH值自然(约5.6)。
| 组分 | 用量(每升) | 作用 |
|---|---|---|
| 马铃薯 | 200克 | 提供维生素、矿物质和碳源 |
| 葡萄糖 | 20克 | 提供快速利用的碳源 |
| 琼脂 | 15-20克 | 培养基凝固剂 |
| 蒸馏水 | 1000毫升 | 溶剂 |
制备马铃薯提取液:将200克马铃薯去皮切块,加入800毫升蒸馏水,煮沸20-30分钟至马铃薯软烂。用4层纱布过滤,取滤液并补足蒸馏水至1000毫升。
添加营养成分:在马铃薯滤液中加入20克葡萄糖和15-20克琼脂,加热搅拌至琼脂完全融化。
分装与灭菌:将培养基分装至锥形瓶或试管,棉塞封口后,于121℃高压蒸汽灭菌20分钟。
凝固与保存:灭菌后趁热摇匀,如需制备平板可倾倒至无菌培养皿,冷却凝固后4℃避光保存,一周内使用。
注意事项:PDA培养基pH通常无需调整(自然pH约5.6),适合真菌生长;若培养细菌,可添加1%蛋白胨并调pH至7.0。灭菌后若发现沉淀,需重新加热溶解并趁热分装。
这种经典配方平衡了营养供给与成本控制,至今仍是微生物实验室的基础选择。你在使用时会优先选择商品化干粉还是自行配制呢?