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ELISA双抗体夹心法一步法检测中,若怀疑存在钩状效应,应采取何措施() A. 加入更多的酶标抗体 B. 增加洗涤次数 C. 缩短孵育时间 D. 降低孵育温度 E. 将标本稀释后再重新检测

ELISA双抗体夹心法一步法检测中,若怀疑存在钩状效应,应采取何措施() A. 加入更多的酶标抗体 B. 增加洗涤次数 C. 缩短孵育时间 D. 降低孵育温度 E. 将标本稀释后再重新检测

钩状效应(hook effect)是指在高浓度待测抗原存在时,由于抗原过量导致抗原与固相抗体和酶标抗体结合比例失衡,反而使最终信号减弱的现象。

ELISA 双抗体夹心法一步法中,两种抗体(固相抗体和酶标抗体)与抗原同时反应,若抗原浓度过高,可能出现钩状效应。

正确的处理措施是:

E. 将标本稀释后再重新检测

这样可将抗原浓度降低至线性范围,避免抗原过量导致的假性低值或假阴性。

其他选项:
A. 加入更多酶标抗体 —— 可能加剧失衡或浪费试剂,不解决根本问题。
B. 增加洗涤次数 —— 主要用于降低背景,不影响钩状效应。
C. 缩短孵育时间 —— 可能影响结合效率,不解决高浓度抗原问题。
D. 降低孵育温度 —— 影响反应速率,不解决钩状效应。

因此正确答案为 E

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